სტერილური ოთახის სტანდარტიზაციის პროცედურები და მიღების სპეციფიკაციები

1. მიზანი: ამ პროცედურის მიზანია ასეპტიკური ოპერაციებისა და სტერილური ოთახების დაცვის სტანდარტიზებული პროცედურის უზრუნველყოფა.

2. გამოყენების სფერო: ბიოლოგიური ტესტირების ლაბორატორია

3. პასუხისმგებელი პირი: ხარისხის კონტროლის ზედამხედველი ტესტერი

4. განმარტება: არცერთი

5. უსაფრთხოების ზომები

მიკრობული დაბინძურების თავიდან ასაცილებლად მკაცრად შეასრულეთ ასეპტიკური ოპერაციები; ოპერატორებმა სტერილურ ოთახში შესვლამდე უნდა გამორთონ ულტრაიისფერი ნათურა.

6. პროცედურები

6.1. სტერილური ოთახი აღჭურვილი უნდა იყოს სტერილური საოპერაციო ოთახითა და ბუფერული ოთახით. სტერილური საოპერაციო ოთახის სისუფთავე უნდა იყოს 10000 კლასის. ოთახის ტემპერატურა უნდა იყოს 20-24°C, ხოლო ტენიანობა - 45-60%. სუფთა მაგიდის სისუფთავე უნდა იყოს 100 კლასის.

6.2. სტერილური ოთახი უნდა იყოს სუფთა და მკაცრად აკრძალულია ნარჩენების დაგროვებაც დაბინძურების თავიდან ასაცილებლად.

6.3. მკაცრად თავიდან აიცილეთ ყველა სტერილიზაციის აღჭურვილობისა და კულტურის საშუალებების დაბინძურება. დაბინძურებულმა საშუალებებმა უნდა შეწყვიტონ მათი გამოყენება.

6.4. სტერილური ოთახი აღჭურვილი უნდა იყოს სამუშაო კონცენტრაციის სადეზინფექციო საშუალებებით, როგორიცაა 5%-იანი კრეზოლის ხსნარი, 70%-იანი სპირტი, 0.1%-იანი ქლორმეთიონინის ხსნარი და ა.შ.

6.5. სტერილური ოთახი რეგულარულად უნდა სტერილიზდეს და გაიწმინდოს შესაბამისი სადეზინფექციო საშუალებით, რათა უზრუნველყოფილი იყოს სტერილური ოთახის სისუფთავის მოთხოვნებთან შესაბამისობა.

6.6. ყველა ინსტრუმენტი, ხელსაწყო, ჭურჭელი და სხვა ნივთი, რომელიც სტერილურ ოთახში უნდა შევიტანოთ, მჭიდროდ უნდა იყოს შეფუთული და სტერილიზებული შესაბამისი მეთოდებით.

6.7. სტერილურ ოთახში შესვლამდე პერსონალმა ხელები უნდა დაიბანოს საპნით ან სადეზინფექციო საშუალებით, შემდეგ კი ბუფერულ ოთახში შესვლამდე გამოიცვალოს სპეციალური სამუშაო ტანსაცმელი, ფეხსაცმელი, ქუდები, ნიღბები და ხელთათმანები (ან ხელები კვლავ 70%-იანი ეთანოლით გაიმშრალოს). ოპერაციები ბაქტერიულ კამერაში უნდა ჩატარდეს.

6.8. სტერილური ოთახის გამოყენებამდე, სტერილურ ოთახში ულტრაიისფერი ნათურა უნდა ჩაირთოს დასხივებისა და სტერილიზაციისთვის 30 წუთზე მეტი ხნის განმავლობაში და ამავდროულად, სუფთა მაგიდა უნდა ჩაირთოს ჰაერის ნაკადისთვის. ოპერაციის დასრულების შემდეგ, სტერილური ოთახი დროულად უნდა გაიწმინდოს და შემდეგ ულტრაიისფერი ნათურით 20 წუთის განმავლობაში სტერილიზებული იყოს.

6.9. შემოწმებამდე, სატესტო ნიმუშის გარე შეფუთვა უნდა იყოს ხელუხლებელი და არ უნდა გაიხსნას დაბინძურების თავიდან ასაცილებლად. შემოწმებამდე, გარე ზედაპირის დეზინფექციისთვის გამოიყენეთ 70%-იანი სპირტიანი ბამბის ბურთულები.

6.10. თითოეული ოპერაციის დროს უნდა ჩატარდეს უარყოფითი კონტროლი ასეპტიკური ოპერაციის სანდოობის შესამოწმებლად.

6.11. ბაქტერიული სითხის შეწოვისას, მის შესაწოვად აუცილებლად გამოიყენეთ შემწოვი ბურთი. არ შეეხოთ საწრუპს პირდაპირ პირით.

6.12. ინოკულაციის ნემსი უნდა იყოს სტერილიზებული ცეცხლზე ყოველი გამოყენების წინ და შემდეგ. გაგრილების შემდეგ, კულტურის ინოკულაცია შესაძლებელია.

6.13. ბაქტერიული სითხის შემცველი ჩხირები, სინჯარა, პეტრის ჯამები და სხვა ჭურჭელი დეზინფექციისთვის უნდა დაალბოთ 5%-იანი ლიზოლის ხსნარის შემცველ სტერილიზაციის ვედროში და 24 საათის შემდეგ გამოიღოთ და გარეცხოთ.

6.14. თუ მაგიდაზე ან იატაკზე ბაქტერიული სითხე დაიღვარა, დამუშავებამდე დაუყოვნებლივ უნდა დაასხათ დაბინძურებულ ადგილას 5%-იანი კარბოლის მჟავას ხსნარი ან 3%-იანი ლიზოლი მინიმუმ 30 წუთით ადრე. როდესაც სამუშაო ტანსაცმელი და ქუდები დაბინძურებულია ბაქტერიული სითხით, ისინი დაუყოვნებლივ უნდა გაიხადოთ და გაირეცხოს მაღალი წნევის ორთქლით სტერილიზაციის შემდეგ.

6.15. ონკანის ქვეშ გარეცხვამდე უნდა მოხდეს ცოცხალი ბაქტერიების შემცველი ყველა ნივთის დეზინფექცია. კანალიზაციის დაბინძურება მკაცრად აკრძალულია.

6.16. სტერილურ ოთახში კოლონიების რაოდენობა ყოველთვიურად უნდა შემოწმდეს. სუფთა დახლის გახსნისას, აიღეთ 90 მმ შიდა დიამეტრის რამდენიმე სტერილური პეტრის ჯამი და ასეპტიკურად შეიყვანეთ დაახლოებით 15 მლ მკვებავი აგარის კულტურული საშუალება, რომელიც გამდნარი და დაახლოებით 45°C-მდე გაცივებულია. გამყარების შემდეგ, მოათავსეთ იგი თავდაყირა 30-35°C ტემპერატურაზე. ინკუბაცია 48 საათის განმავლობაში ℃ ინკუბატორში. სტერილურობის დამტკიცების შემდეგ, აიღეთ 3-5 ფირფიტა და მოათავსეთ სამუშაო პოზიციის მარცხენა, შუა და მარჯვენა მხარეს. თავსახურის გახსნის და 30 წუთის განმავლობაში გამოფენის შემდეგ, მოათავსეთ ისინი თავდაყირა 30-35°C ტემპერატურაზე 48 საათის განმავლობაში და ამოიღეთ. შეამოწმეთ. 100 კლასის სუფთა სივრცეში ფირფიტაზე სხვადასხვა ბაქტერიების საშუალო რაოდენობა არ უნდა აღემატებოდეს 1 კოლონიას, ხოლო 10000 კლასის სუფთა ოთახში საშუალო რაოდენობა არ უნდა აღემატებოდეს 3 კოლონიას. თუ ზღვარი გადაჭარბებულია, სტერილური ოთახი საფუძვლიანად უნდა იყოს დეზინფექცია მანამ, სანამ განმეორებითი შემოწმებები არ დააკმაყოფილებს მოთხოვნებს.

7. იხილეთ თავი (სტერილობის შემოწმების მეთოდი) „წამლების ჰიგიენური შემოწმების მეთოდები“ და „წამლების შემოწმების ჩინეთის სტანდარტული ოპერაციული პრაქტიკა“.

8. დისტრიბუციის დეპარტამენტი: ხარისხის მართვის დეპარტამენტი

სუფთა ოთახის ტექნიკური ინსტრუქციები:

სტერილური გარემოსა და სტერილური მასალების მიღების შემდეგ, კონკრეტული ცნობილი მიკროორგანიზმის შესასწავლად ან მათი ფუნქციების გამოსაყენებლად, ჩვენ უნდა შევინარჩუნოთ სტერილური მდგომარეობა. წინააღმდეგ შემთხვევაში, გარედან სხვადასხვა მიკროორგანიზმები ადვილად შეიძლება შეერევა. გარედან უმნიშვნელო მიკროორგანიზმების შერევის ფენომენს მიკრობიოლოგიაში დამაბინძურებელი ბაქტერიები ეწოდება. დაბინძურების პრევენცია მიკრობიოლოგიურ სამუშაოებში კრიტიკული ტექნიკაა. ერთი მხრივ, სრული სტერილიზაცია და მეორე მხრივ, დაბინძურების პრევენცია ასეპტიკური ტექნიკის ორი ასპექტია. გარდა ამისა, ჩვენ უნდა ავიცილოთ თავიდან შესწავლილი მიკროორგანიზმების, განსაკუთრებით პათოგენური მიკროორგანიზმების ან გენმოდიფიცირებული მიკროორგანიზმების, რომლებიც ბუნებაში არ არსებობს, გაქცევა ჩვენი ექსპერიმენტული კონტეინერებიდან გარე გარემოში. ამ მიზნებისთვის, მიკრობიოლოგიაში, მრავალი ღონისძიება არსებობს.

სტერილური ოთახი, როგორც წესი, მიკრობიოლოგიის ლაბორატორიისთვის სპეციალურად მოწყობილი პატარა ოთახია. შეიძლება აშენდეს ფურცლებითა და მინით. ფართობი არ უნდა იყოს ძალიან დიდი, დაახლოებით 4-5 კვადრატული მეტრი, ხოლო სიმაღლე დაახლოებით 2.5 მეტრი. ბუფერული ოთახის გარეთ უნდა მოთავსდეს ბუფერული ოთახი. ბუფერული ოთახის კარი და სტერილური ოთახის კარი ერთი მიმართულებით არ უნდა იყოს მიმართული, რათა ჰაერის ნაკადის შედეგად სხვადასხვა ბაქტერიები არ შევიდეს. როგორც სტერილურ, ასევე ბუფერულ ოთახებში ჰერმეტული უნდა იყოს. შიდა ვენტილაციის აღჭურვილობას უნდა ჰქონდეს ჰაერის ფილტრაციის მოწყობილობები. სტერილური ოთახის იატაკი და კედლები უნდა იყოს გლუვი, ჭუჭყისგან თავისუფალი და ადვილად გასაწმენდი. სამუშაო ზედაპირი უნდა იყოს სწორი. როგორც სტერილურ, ასევე ბუფერულ ოთახებში დამონტაჟებულია ულტრაიისფერი ნათურები. სტერილურ ოთახში ულტრაიისფერი ნათურები სამუშაო ზედაპირიდან 1 მეტრის დაშორებით მდებარეობს. სტერილურ ოთახში შესულ პერსონალს უნდა ეცვას სტერილიზებული ტანსაცმელი და ქუდები.

ამჟამად, სტერილური ოთახები ძირითადად მიკრობიოლოგიის ქარხნებშია, ხოლო ზოგადი ლაბორატორიები სუფთა სკამებს იყენებენ. სუფთა სკამის მთავარი ფუნქციაა ლამინარული ჰაერის ნაკადის მოწყობილობის გამოყენება სამუშაო ზედაპირზე არსებული სხვადასხვა წვრილი მტვრის, მათ შორის მიკროორგანიზმების მოსაშორებლად. ელექტრო მოწყობილობა ჰაერს საშუალებას აძლევს გაიაროს HEPA ფილტრში და შემდეგ შევიდეს სამუშაო ზედაპირზე, რათა სამუშაო ზედაპირი ყოველთვის სტერილური ჰაერის ნაკადის კონტროლის ქვეშ იყოს. გარდა ამისა, გარედან ახლოს მდებარე მხარეს არის მაღალსიჩქარიანი ჰაერის ფარდა, რათა თავიდან აიცილოს გარე ბაქტერიული ჰაერის შეღწევა.

რთულ პირობებში, სუფთა სკამის ნაცვლად, ასევე შესაძლებელია ხის სტერილური ყუთების გამოყენება. სტერილურ ყუთს მარტივი სტრუქტურა აქვს და მისი გადაადგილება მარტივია. ყუთის წინა მხარეს ორი ნახვრეტია, რომლებიც, როდესაც ის არ მუშაობს, იკეტება ბიძგიანი კარებით. მუშაობის დროს შეგიძლიათ ხელები შიგნით შეყოთ. წინა ნაწილის ზედა ნაწილი აღჭურვილია მინით, რაც შიდა მუშაობას გაგიადვილებთ. ყუთში ულტრაიისფერი ნათურაა, ხოლო ჭურჭლისა და ბაქტერიების შეყვანა გვერდზე მდებარე პატარა კარიდანაა შესაძლებელი.

ასეპტიკური ოპერაციული ტექნიკა ამჟამად არა მხოლოდ გადამწყვეტ როლს ასრულებს მიკრობიოლოგიურ კვლევასა და გამოყენებაში, არამედ ფართოდ გამოიყენება მრავალ ბიოტექნოლოგიაში. მაგალითად, ტრანსგენურ ტექნოლოგიაში, მონოკლონური ანტისხეულების ტექნოლოგიაში და ა.შ.